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紫外分光光度計校正方法
來源:http://www.rolypigusa.com/   作者:紫外可見分光光度計    更新日期:2014-07-23 20:11:45   
摘要:分光光度法的最重要的一個物理化學量是吸光度。為了獲得準確的研究結果,準確測得樣品溶液的吸光度是非常重要的。一般,分析結果的不可靠性與偶然誤差和係統誤差有關。

                                               龍門娛樂分光光度計

      紫外分光光度計的校正方法如下:

  分光光度法的最重要的一個物理化學量是吸光度。為了獲得準確的研究結果,準確測得樣品溶液的吸光度是非常重要的。一般,分析結果的不可靠性與偶然誤差和係統誤差有關。偶然誤差影響測量的精密度,可通過足夠數量測量的統計處理來減少;係統誤差影響測量結果的準確度,可在大體相同實驗條件下,用比較一種物質的準確測量結果,使係統誤差統一起來。而分光光度計的係統誤差(波長校正、分光光度計的慢散光、放大器的線性響應、暗電流和比色皿的光程)及操作誤差(溫度改變、儀器讀數、操作者的改變、使用物質的純度、稱量和濃度、pH)對測量吸光度的影響是可以檢查和校正的。關於操作誤差,多數情況下,通過嚴格按操作程序測量、儀器調零、準確稱量等來控製或減少這種誤差的產生。關於儀器的係統誤差,可通過對分光光度計的定期校正來克服,若所需準確度很高的測量,則必須天天校正。
  
    校正內容:
  1.波長的準確度試驗 以儀器顯示的波長數值與單色光的實際波長值之間誤差表示,應在±1.0nm範圍內。可用儀器中氘燈的486.02nm與656.10nm譜線進行校正;
  2.吸收度的準確度試驗;
  3.雜散光的試驗;
  4.波長重現性試驗;
  5.分辨率試驗。
  
    吸光度的校正方法:
  校正吸光度常用一很純物質一定濃度的溶液為標準,且此溶液的吸光度係數經不同實驗室核對,為了使標準液吸光度不受測定波長的微移動而有改變,常選擇具有較平滑吸收高峰的物質,同時要求溶液穩定,且在相當的波長範圍內吸收度的改變符合Beer-Lambert定律,常用硫酸銅、硫酸銨鈷和硝酸鈉或鉀的溶液。鉻酸鉀溶液是最常用的標準溶液,此溶液在紫外區和可見區均適用。
  
    波長或波數的校正方法:
  可用具有窄吸收帶的溶液,濾光片或蒸氣來校正所需要的光波範圍。如果要求很高的精密度時,可用放電燈泡發射的射線來校正。有的光譜儀其上已裝有一個為校正用的燈。苯的蒸氣對校正一定範圍的波長亦很有用,可用一小滴苯放於一厘米厚的吸收杯中,測其吸收波長,在遠紫外區可用氧氣的吸收帶進行校正。用各種稀土金屬的濾光片,可以很快地校正波長,但準確度不如上述方法高。常用含有鈥和釹、鐠離子的濾光片。
  
    雜散光的校正方法:
  小量的雜散光往往會引起較大的測量誤差,它的校正可用一個能完全吸收某一波長單色光,且在其他波長吸收很弱的溶液。從這個溶液所表現的透光情況可推測雜散光的近似值。由雜散光帶來的偽吸收帶,亦可用Beer-Lambert定律來檢查,但用此定律檢查偽吸收帶誤差較大。由切斷範圍之外所表現的透射比可得出近似的雜散光百分數。若所含雜散光大於0.1%,應設法減低,或對測得的吸收光度進行校正。由雜散光引起的誤差與雜散輻射成正比,因此校正值很容易從化合物的近於正確的曲線計算而得。此外,還可用一個適當的濾光片,該濾光片在測定波長範圍內完全透光,但吸收此範圍外的光波,由此來消除雜散光。

 

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